SHH信号通路调控hiPSCs定向分化为腹侧底板类神经前体细胞
目的 激活Sonic Hedgehog (SHH)信号通路促进人诱导性多能干细胞(hiPSCs)定向分化为腹侧底板类细胞.方法 将hiPSCs设3个实验组:LDN193189+SB431542组(LSB组)、SHH C24-Ⅱ+ Purmorphamine组(SHH组)和Cyclopamine组(CYC组).采用RT-qPCR检测诱导第7天各组细胞背侧前脑标志物PAX6、腹侧底板标志物FOXA2和SHH信号通路关键因子SHH、Ptc-1、Smo、Gli-1及诱导第11天多巴胺能神经前体细胞LMX1A、EN1的mRNA表达.免疫细胞化学(ICC)检测诱导第7天FOXA2、PAX6及分化第25天多巴胺能神经元标志物TH的蛋白表达.结果 RT-qPCR结果显示分化第7天,SHH组FOXA2的mRNA表达明显上调(P＜0.01),PAX6的表达明显下调(P＜0.01);SHH信号通路相关因子SHH、Ptc-1及Gli-1的表达明显上调(P＜0.01),Smo的表达无明显变化;ICC结果显示LSB组、CYC组以PAX6+细胞为主;SHH组以FOXA2+细胞细胞为主;分化第11天,SHH组多巴胺能神经前体标志物LMX1A及EN1的mRNA表达量较LSB组高(P＜0.05);分化第25天ICC结果显示SHH组TH+细胞数量较LSB、CYC组多.结论 分化早期激活SHH信号可诱导hiPSCs定向分化为FOXA2+的腹侧底板细胞,该类细胞能进一步分化为多巴胺能神经前体细胞及多巴胺能神经元.
人诱导性多能干细胞、SHH信号通路、腹侧底板、神经前体细胞、帕金森病
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R743.3;R329.2;R457.7
国家自然科学基金;广东省自然科学基金;广州医科大学高水平大学建设科研教学学术提升项目
2019-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
5-11
