10.3969/j.issn.1671-0770.2012.03.012
人源His-talin1原核表达载体的构建及其蛋白表达
目的 克隆人源talin1 cDNA,构建其高效原核表达载体,并纯化得到高纯度His-talin1融合蛋白.方法 PCR法扩增talin1基因并连接到原核表达载体pET32a(+),筛选和测序鉴定阳性克隆.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达和亲和层析分离纯化表达产物,对纯化的蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 成功扩增了2.4kb的talin1基因,构建了pET32a(+)-talin1重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达出His-talin1融合蛋白.经SDS-PAGE和Western blot方法,验证了高纯度纯化的融合蛋白.结论 建立了高效稳定的His-talin1表达体系,为进一步研究Talin1蛋白的结构及其与P-selectin之间的关系打下基础.
原核表达、Talin基因重组、亲和层析、P-selectin
34
R39;R73
2012-11-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
212-214