10.3969/j.issn.1671-0770.2012.02.008
重组真核表达载体pEGFP-BDNF的构建
目的 将脑源性神经生长因子(BDNF)构建到表达质粒(pEGFP-N1)上.方法 本实验采用RT-PCR的方法,从大鼠海马总RNA中扩增目的基因,分别用一步法(直接构建到表达载体上)和两步法(先构建到克隆载体再构建到表达载体上)构建重组载体,通过酶切和基因测序筛选鉴定正确的阳性克隆,并对两种方法做简单的比较.结果 两种方法构建的重组载体都插入了正确的序列.两步法的转染效率明显高于一步法,但一步法也同样得到了正确的阳性克隆.结论 成功构建了pEGFP-BDNF重组表达载体.
脑源性神经生长因子、基因克隆、增强型绿色荧光蛋白
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R73;R74
广东省自然科学基金项目9151063101000016;广州市科技局应用基础研究计划项目2009J1-C361-2
2012-08-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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