PIK3CA基因突变数字PCR参考测量方法研究

摘要：

PIK3CA突变检测是实现肿瘤个体化治疗的重要预测因子.以PIK3CA为目的基因,选择E542K、E545K、H1047R三个热点突变,建立对其准确定量检测的微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)方法.优化退火温度、引物探针浓度等条件,对方法特异性、线性范围、重复性等方面进行考察.结果表明,建立的ddPCR检测方法精密度好,在突变丰度(0.05～82.75)％范围内相对标准偏差值介于(0.392～14.031)％,准确性高,与重量法的相关系数达到99.91％、99.98％、99.94％;在突变丰度0.2％以上,方法的重复性可达5％以内;在突变丰度0.2％以下,重复性保持在15％以下.在20 μL反应体系中3个热点突变的空白限分别为0.03％、0.04％、0.04％,检测下限和定量下限均为0.05％.因此,所建立的PIK3CA基因E542K、E545K及H1047R位点突变的ddPCR参考测量灵敏度高,重复性好,在癌症诊断、个体化用药指导和预后方面具有良好的应用.

关键词：计量学、PIK3CA、基因突变、数字PCR、定量

所属期刊栏目：44

分类号：TB99(计量学)

资助基金：国家质量基础的共性技术研究与应用专项;中国计量科学研究院基本科研业务费

在线出版日期：2023-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：368-376