嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3蛋白酶基因的原核表达、纯化和性质表征

摘要：

将来源于嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3的蛋白酶(PH1704)基因在大肠杆菌BLP-CodonPlus中高效表达. 采用超声、 热失活和HiTrap Q Sepharose柱层析等方法对产物进行分离纯化. 通过SDS-PAGE, Native-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定, 发现该重组酶以十二聚体为主的寡聚体形式存在, 并具有SDS抗性. 蛋白酶活力染色表明, 其六聚体以上有活力. 以azo-gelation为底物, 对其酶学性质进行初步研究表明, 其最适温度为85 ℃, 最适pH=8.0, 并且具有良好的热稳定性.

关键词：嗜热蛋白酶、表达、纯化、性质

所属期刊栏目：48

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31070638;吉林省自然科学基金20105109;吉林大学基本科研业务费专项基金200810019

在线出版日期：2011-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1065-1069