杧果矮化基因GA2ox的克隆、亚细胞定位及表达分析

摘要：

[目的]为研究杧果树体发育过程中GA合成调控以及GA信号转导的作用提供参考,并为矮生型杧果品种及矮化砧木的选育提供参考.[方法]以广西地方具有矮化特性杧果品种‘桂热杧82号’无病虫侵害的嫩叶为材料,对其GA2ox基因克隆,并进行亚细胞定位及表达分析.通过改良Trizol法提取叶片总RNA,利用简并引物克隆GA2ox基因片段,采用RACE法得到基因的全长eDNA序列,命名为MiGA2ox.通过生物信息学方法分析其结构特征,利用GFP进行亚细胞定位,采用实时荧光定量RT-PCR技术研究MiGA2ox基因在‘桂热柁82号’与乔化品种‘金煌杧’中的表达特性.[结果]MiGA2ox全长cDNA序列为2 051 bp,含有3'非翻译区约900 bp,5'非翻译区约400 bp.GA2ox序列均含有完整的开放阅读框,终止密码子为TGA,编码341个氨基酸,与橙子(XM 006467404.3)、柑橘(XM 006449629.2)、木薯(XM 021738345.1)、巴西橡胶树(XM_021820571.1)、陆地棉(XM_016896568.1)、中棉(XM_012597405.1)的一致性分别为79％、79％、78％、78％、76％、75％.MiGA2ox编码蛋白的相对分子质量为38 729.4 Da,等电点为6.56,为稳定蛋白,无信号肽,无明显疏水区,无跨膜结构域.根据共聚焦激光扫描显微镜观察结果可知,MiGA2ox编码蛋白定位于细胞核中.在随机选择2个时间节点,矮化品种‘桂热杧82号’MiGA2ox的表达量均高于乔化品种‘金煌杧’.[结论]‘桂热柁82号’MiGA2ox基因的表达与其矮化性状有关.

关键词：矮化、杧果、克隆、亚细胞定位、表达分析

所属期刊栏目：38

分类号：S667.7(果树园艺)

资助基金：广西自然科学基金项目;广西亚热带作物研究所基本科研业务费专项项目;现代农业产业技术体系广西创新团队建设专项经费项目

在线出版日期：2020-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：90-98