利用正交设计优化茶树ISSR反应体系

摘要：

为优化茶树ISSR分子标记反应体系,对影响茶树ISSR反应较大的Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度5个因素在4水平上进行优化试验,建立了适合于茶树ISSR-PCR(Inter Simple Sequence Repeats-Polymerase Chain Reaction)的最佳体系:20 μL反应体系中,Taq DNA聚合酶0.75 U/μL,10×buffer(含Mg2+)2.0 mmol·L-1,模板DNA 20 ng,dNTP 0.1 mmol·L-1,引物0.3 μmol·L-1.反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,50～60 C退火40 s,72℃延伸90 s,34次循环,72℃延伸7 min,4℃保存.

关键词：茶树ISSR、正交设计、反应体系

所属期刊栏目：28

分类号：S571.1

资助基金：江苏省科技攻关计划;苏州市农业科技攻关计划;国家自然科学基金;现代农业产业技术体系建设专项

在线出版日期：2010-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：14-19