鹿茸顶端组织miRNA芯片制备及差异表达miRNA的筛选

摘要：

为制备梅花鹿鹿茸顶端间充质组织及软骨组织miRNA芯片,分离鹿茸间充质和软骨组织细胞,利用TRIzol试剂法分别提取细胞的总RNA,并进行miRNA生物素标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,再进行芯片扫描及数据处理,应用相对荧光定量Real-time PCR法验证部分miRNA芯片结果的可靠性.研究结果显示:筛选得到鹿茸间充质和软骨组织miRNA差异表达谱.间充质部位存在的miRNA为289个,软骨部位存在的miRNA条数为304条.其中间充质组织中117个miRNA表达上调,71个miRNA表达下调;软骨组织中97个miRNA表达上调,87个miRNA表达下调;两个组织中共同存在且具有显著差异性表达的miRNA为158个.Real-time PCR法验证结果显示,相对于间充质细胞,miR-1、miR-18a、miR-18b、miR-19a、miR-19b、miR-20b和miR-let-7f的表达均上调;而miR-99b、miR-130b及miR-184的表达均下调,与芯片结果一致.

关键词：鹿茸、间充质、软骨、miRNA芯片、差异表达

所属期刊栏目：20

分类号：S852.23(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31572372,30972083,吉林省科技发展计划项目20090574

在线出版日期：2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：83-88