BNP和IL-6双标记时间分辨免疫荧光检测方法的建立及初步应用

摘要：

目的 研制一种脑钠肽(BNP)、白细胞介素-6(IL-6)的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并对其性能进行初步评价.方法 将抗BNP和IL-6 单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在 96 孔板,用Eu3+和Sm3+分别标记另一配对抗体作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒.进行灵敏度、准确度、重复性、特异性、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能.结果 制备的双标记时间分辨免疫荧光试剂盒对BNP检测的线性范围为 10 pg/mL～5 000 pg/mL,灵敏度为8.65 pg/mL,对IL-6检测的线性范围为 1 pg/mL～1000 pg/mL,灵敏度为 5.36 pg/mL.BNP的回收率在 91.49%～99.16%,批内CV在 5.73%～8.96%,批间CV在 8.42%～11.73%;IL-6 的回收率在 93.95%～111.50%,批内CV在 7.32%～10.07%,批间CV在 9.40%～11.30%.与血清中常见的脓毒血症检测指标均无明显的交叉反应.试剂盒能够在 4℃稳定保存半年,37℃稳定保存7d.对临床样本的检测发现,该方法参考区间Cut-off值BNP:46.01 pg/mL,IL-6:13.62 pg/mL;检测结果与临床诊断结果一致,准确性较好.结论 建立的BNP和IL-6 双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异性、高准确率、方便快捷等优点,可作为预警脓毒症发生、预测脓毒症病情程度及临床预后的一种新的实验室检测方法.

关键词：脓毒血症、双抗体夹心、双标记时间分辨免疫荧光分析

所属期刊栏目：41

分类号：R446.61(诊断学)

资助基金：国家卫计委河南省联合共建项目;河南省科技厅科技攻关项目

在线出版日期：2023-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：127-131