基于COXⅠ及ITS基因粪类圆线虫PCR鉴定方法的建立

摘要：

目的 探讨以COXⅠ及ITS基因作为分子标记的PCR技术在粪类圆线虫病诊断中的应用.方法 收集粪类圆线虫病患者的粪便作为检验物,离心沉淀法处理粪便,弃去粪渣,浓集、纯化粪便中的粪类圆线虫虫体,光学显微镜下观察虫体做形态学初判.PCR扩增COXⅠ及ITS基因,1％琼脂糖凝胶电泳鉴定目的片段.结果 琼脂糖凝胶电泳紫外成像显示,COXⅠ和ITS基因目的条带单一、清晰,大小分别约为1500bp和900bp.COXⅠ基因的退火温度为48℃、ITS退火温度为50℃时有清晰的特异性条带.COX I基因条带与Genebank中其他线虫COX I基因片段大小一致,可作为粪类圆线虫虫种鉴定的分子标记.而在Genebank中检索到不同线虫的ITS基因,分别含有18S、5.8S和28S的部分或完全序列,因此碱基长度变化较大,若以ITS鉴别虫种需进一步做Blast分析.结论 基于COXⅠ及ITS基因的粪类圆线虫分子检验方法应用于临床上,可有效提高粪类圆线虫病诊断的特异性和敏感性.

关键词：粪类圆线虫、COXⅠ基因、ITS基因

所属期刊栏目：39

分类号：R532.1(寄生虫病)

资助基金：教育厅科学研究项目No.Hnky2017ZD-15

在线出版日期：2021-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：267-270