胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响

摘要：

目的：探讨高胆红素血清对实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的影响，并选择有效减低胆红素对HBV DNA测定干扰的方法。方法将不同浓度的HBV DNA标准品（S1-S4：3.0×107、3.0×106、3.0×105、3.0×104IU/ml）按相同比例分别添加到胆红素正常血清和高胆红素血清中，按不同浓度胆红素进行分组来考察不同浓度胆红素血症对HBV DNA测定结果的影响程度大小，然后再分别测定HBV DNA的结果，每个标本重复检测三次，同时观察扩增曲线是否存在差异。对影响测定的血清标本作10、100、1000倍稀释后，进行检测，并收集5例临床高胆红素的乙肝血清标本进行验证。结果血清胆红素浓度介于401~500μmol/L、501~600μmol/L、>600μmol/L三个组，HBV DNA定量检测结果高于胆红素正常血清组，差异有统计学意义（P＜0.05），血清胆红素浓度浓度介于20.6~100μmol/L、101~200μmol/L、201~300μmol/L和301~400μmol/L四个组，与胆红素正常血清组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；血清胆红素浓度高于400μmol/L血清扩增时，扩增曲线先缓慢升高，其基线高于标准品，其阈值线处于拐点之下非S扩增区，之后升高呈现S型曲线；10、100、1000倍稀释后，扩增曲线平行且等间距，结果一致性较好。5例高胆红素血清有4例在定阈值线时，其阈值线处于拐点之下非S扩增区，定值偏高，结果高于稀释后的标本，差异有统计学意义(P＜0.05)；有1例阈值线处于拐点处，其斜率低于标准品，结果低于稀释后的标本，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论总胆红素高于400μmol/L对荧光定量PCR检测HBV DNA结果存在影响，通过稀释一般就可以降低胆红素因素干扰。

关键词：实时荧光定量PCR、HBV DNA、胆红素

所属期刊栏目：34

分类号：R446.11+2;R512.6+2(诊断学)

资助基金：盐城市科技立项课题，编号YK2015002

在线出版日期：2016-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：283-285,297