10.3969/j.issn.1674-1129.2016.01.002
iPSC-MSC来源的外泌体对LPS刺激肺泡巨噬细胞产生炎性因子的影响
目的:探讨iPSC-MSC来源的外泌体(exosome,Exo)对LPS刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用。方法采用旋转超滤法提纯iPSC-MSC外泌体,以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383,分别给予Exo(50μg/ml)、LPS(50ng/ml)、LPS(50ng/ml)+Exo(50μg/ml)培养24h,以不含 Exo 和 LPS 培养为对照组,利用酶联免疫标记法(ELISA)检测各组上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白浓度。结果提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡,直径40~100nm,表达Exo标志物CD9和CD63;LPS组上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度(435.38±36.31pg/ml、319.76±39.14pg/ml和408.33±43.44pg/ml)与空白对照组(37.48±8.75pg/ml、33.51±7.88pg/ml和37.73±8.46pg/ml)和Exo组(38.71±9.14pg/ml、32.05±6.81pg/ml和42.84±6.54pg/ml)比较显著上调(P<0.01);LPS+Exo 组TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度(369.30±32.74pg/ml、249.23±36.77pg/ml 和328.91±46.45pg/ml)与LPS组相比,明显减少(P<0.05);空白对照组与Exo组的TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度无显著性差异。结论成功富集Exo;iPSC-MSC来源的Exo可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞表达炎性因子。
外泌体、肺泡巨噬细胞、脓毒症肺损伤、炎症因子、旋转超滤法
R631;R446.62(外科感染)
国家自然科学基金81460292;国家自然科学基金81560306
2016-04-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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