EGF-linker-PE40重组毒素的构建、表达及其意义

摘要：

目的 构建人表皮生长因子(EGF)-柔性连接肽(linker)-铜绿假单胞菌外毒素活性片段(PE40)重组毒素的表达载体并诱导表达,以探索其成为治疗肿瘤新型靶向药物的可能性.方法 用PCR技术扩增出EGF和PE40基因,通过引物设计在两者之间加上19个中性氨基酸短肽(TS-(G4S)3-AC)的linker编码序列、克隆PCR产物,并构建pET22b(+)-EGF-linker-PE40表达质粒,将其转化E.coli BL21(DE3)后,诱导表达,SDS-PAGE及凝胶薄层扫描分析EGF-linker-PE40重组毒素的表达情况.结果 EGF-linker-PE40重组毒素在BL21(DE3)中可溶性表达,目的蛋白占细胞总蛋白的18%左右.结论 应用基因工程技术,成功地构建了重组毒素EGF-linker-PE40的表达载体,并得到高效可溶性表达,为进一步研究其结构功能关系和肿瘤临床应用奠定了基础.

关键词：表皮生长因子、铜绿假单胞菌、外毒素、重组

所属期刊栏目：28

分类号：R734.2;Q786(肿瘤学)

在线出版日期：2011-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：443-446