10.3969/j.issn.1673-0143.2012.05.019
利用PCR产物一步法敲除大肠埃希菌的外排泵基因acrAB
通过电转化将一段PCR产物引入宿主菌BW25113/pIJ790细胞内,PCR产物两端有与染色体同源的30个核苷酸序列,中间是抗生素抗性基因。pIJ790上编码λ噬菌体的3个重组蛋白:Exo、Bet和Gam组成Red重组系统,可实现线性片段的一步法高效重组,以PCR产物中的抗生素抗性基因取代靶基因。通过该方法得到了大肠埃希菌的外排泵基因acrAB敲除突变株,该菌株在抗菌物质的抗菌机制研究方面能发挥一定的作用。
Red重组、PCR、基因敲除、外排泵基因
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Q789;R378.21(基因工程(遗传工程))
武汉市科技局青年科技晨光计划项目201271031394;环境化学与生态毒理学国家重点实验室开放基金课题KF2011-06
2013-01-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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