NCAPH基因敲除对胰腺癌细胞增殖迁移及侵袭能力的影响

摘要：

目的 探究NCAPH基因敲除对胰腺癌PANC细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 利用Oncomine数据库分析NCAPH在胰腺癌及其他癌组织中的表达水平;Kaplan-Meier plotter数据库分析NCAPH高低表达与胰腺癌患者预后的相关性;使用CRISPR/Cas9技术构建NCAPH基因敲除慢病毒建立NCAPH基因敲除细胞株;通过CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell实验及划痕实验检测敲除NCAPH基因对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,Western blotting检测MEK及ERK等蛋白的表达.结果 NCAPH在胰腺癌、胃癌、结直肠癌及结肠癌组织中的表达均显著上调.Kaplan-Meier plotter数据库分析显示,NCAPH高表达组胰腺癌患者的预后不良(P<0.05);Western blotting检测结果显示,CRISPR/Cas9基因编辑技术能有效敲除胰腺癌PANC细胞系的NCAPH基因,从而抑制NCAPH蛋白的表达.CCK-8实验及克隆形成实验结果显示,与对照组相比,NCAPH敲除明显抑制了PANC细胞在48、72、96及120 h的增殖能力(0.488±0.007 vs.0.411±0.004、0.689±0.004 vs.0.497±0.010、1.071±0.034 vs.0.689±0.020、1.441±0.038 vs.0.855±0.025)及克隆形成能力(210.0±2.9 vs.144.0±16.4),差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验及Transwell实验结果显示,与对照组相比,NCAPH敲除明显抑制了PANC细胞的迁移能力(34.9％±1.7％vs.15.1％±2.1％)及侵袭能力[(351±23.64)个vs.(194±13.0)个],差异有统计学意义(P<0.05).与PANC正常细胞株相比,PANC敲除细胞株的p-ERK及p-MEK蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NCAPH敲除可明显抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与MAPK/ERK信号通路有关.

关键词：胰腺癌、NCAPH、细胞增殖、细胞迁移

所属期刊栏目：47

分类号：R735.9(肿瘤学)

资助基金：甘肃省青年科技基金20JR5RA323

在线出版日期：2022-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：555-560