长链非编码RNA SNHG1对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.方法 纳入2019－2021年在宁夏医科大学总医院烧伤整形外科接受手术治疗的22例增生性瘢痕患者,收集其增生性瘢痕组织与瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内),从中分离培养成纤维细胞.采用qRT-PCR从组织和细胞水平检测SNHG1 mRNA和miR-382-3p相对表达水平.将增生性瘢痕成纤维细胞随机分为对照组、SNHG1阴性对照组(转染慢病毒空载体)、模拟物对照组(转染对照模拟物)、SNHG1阴性对照+模拟物对照组(转染慢病毒空载体和对照模拟物)、SNHG1过表达组(转染过表达慢病毒)、miR-382-3p过表达组(转染miR-382-3p模拟物)、SNHG1过表达+模拟物对照组(转染过表达慢病毒和对照模拟物)与SNHG1过表达+miR-382-3p过表达组(转染过表达慢病毒和miR-382-3p模拟物),采用qRT-PCR检测各组SNHG1、PCNA、p27 mRNA和miR-382-3p的相对表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖能力;EdU染色法检测各组细胞增殖水平;Western blotting检测各组p27和PCNA蛋白表达水平.结果 与正常皮肤组织及其成纤维细胞相比,SNHG1 mRNA在增生性瘢痕组织(3.21±2.65 vs. 1.14±0.61, P<0.001)及其成纤维细胞中呈高表达(0.91±0.08 vs . 0.54±0.08, P<0.01),而miR-382-3p表达下调(组织:0.53±0.34 vs. 1.15±0.61,P<0.001;细胞:0.84±0.09 vs . 1.01±0.004, P<0.05).与SNHG1阴性对照组相比, SNHG1过表达组细胞增殖能力增强(0.23±0.03 vs . 0.16±0.01, P<0.001), EdU阳性细胞百分比明显增高(30.01%±5.70% vs . 7.13%±4.40%, P<0.001), PCNA mRNA和蛋白相对表达水平增高(mRNA:2.97±0.33 vs. 0.98±0.25, P<0.01;蛋白:2.20±0.09 vs. 0.88±0.20,P<0.05),p27 mRNA和蛋白相对表达水平降低(mRNA:0.30±0.03 vs. 1.42±0.15,P<0.001;蛋白:0.47±0.11 vs. 1.13±0.19, P<0.05), miR-382-3p相对表达水平降低(0.05±0.01 vs . 1.03±0.12, P<0.001);与SNHG1过表达+模拟物对照组相比,SNHG1过表达+miR-382-3p过表达组细胞增殖能力减弱(0.15±0.02 vs . 0.26±0.01, P<0.001),EdU阳性细胞百分比下降(5.97%±0.33% vs . 11.70%±0.87%, P<0.001),PCNA mRNA和蛋白相对表达水平降低(mRNA:0.64±0.09 vs. 3.33±0.38,P<0.001;蛋白:1.70±0.36 vs. 2.34±0.16,P<0.05),p27 mRNA和蛋白相对表达水平升高(mRNA:1.01±0.44 vs. 0.09±0.04,P<0.05;蛋白:1.38±0.31 vs. 0.50±0.09,P<0.05).结论 SNHG1在增生性瘢痕中呈高表达,可负向调控miR-382-3p的表达,进而促进增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,有望成为治疗增生性瘢痕的新靶点.

关键词：增生性瘢痕;成纤维细胞;核仁小RNA宿主基因1;细胞增殖

所属期刊栏目：47

分类号：R622(整形外科学（修复外科学）)

资助基金：国家自然科学基金;宁夏高等学校一流学科建设宁夏医科大学国内一流建设学科临床医学资助项目;宁夏医科大学国家级大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2022-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：118-127