沉默轴突导向蛋白4D对胃癌细胞SGC-7901生长、自噬及上皮-间质转化的影响

摘要：

目的 探讨沉默轴突导向蛋白4D(Sema4D)对胃癌细胞SGC-7901生长、自噬及上皮-间质转化的影响.方法 将SGC-7901细胞随机分为对照组、shRNA-NC组、Sema4D-shRNA1组、Sema4D-shRNA2组与Sema4D-shRNA3组,构建shRNA Sema4D载体转染至SGC-7901细胞.采用RT-PCR检测各组Sema4D mRNA表达水平;采用克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;显微镜观察上皮-间质转化形态学变化;Western blotting检测Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白表达水平.结果 RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA1组、Sema4D-shRNA2组和Sema4D-shRNA3组Sema4D mRNA表达水平均明显降低,且Sema4D-shRNA3组明显低于Sema4D-shRNA1组和Sema4D-shRNA2组(P<0.05),选择Sema4D-shRNA3进行后续试验.克隆形成实验结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA3组克隆形成率明显降低(P<0.05).流式细胞仪检测结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA3组细胞凋亡率明显升高(P<0.05).Western blotting检测结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA3组Ki-67、PCNA、p62、N-cadherin、波形蛋白表达水平明显降低,Beclin1、E-cadherin蛋白表达水平明显升高,Bax/Bcl-2、cleaved caspase-3/caspase-3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P<0.05).显微镜观察可见Sema4D-shRNA3组细胞上皮-间质转化受到抑制.结论 shRNA Sema4D可抑制SGC-7901细胞的增殖、自噬、上皮-间质转化,促进其凋亡.

关键词：胃癌、轴突导向蛋白4D、自噬、上皮-间质转化

所属期刊栏目：46

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：湖北省教育厅科研项目Q20132605

在线出版日期：2021-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：11-17