MicroRNA-802对胰岛素抵抗的骨骼肌细胞PI3K/Akt通路的影响

摘要：

目的 探讨胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型中miR-802的表达及其与糖代谢及胰岛素敏感性的关系.方法 复苏L6成肌细胞,培养并诱导分化为L6肌细胞,采用高脂(含0.25 mmol/L棕榈酸的培养基)孵育,随机分为正常对照组与棕榈酸组,24 h后分别测定培养基中葡萄糖浓度,判断造模是否成功.成功建立大鼠L6成肌细胞的胰岛素抵抗模型后,通过转染miR-802的模拟物或抑制剂来调节miR-802的表达,分为以下5组:正常对照组、棕榈酸组、棕榈酸+miR-802模拟物组、棕榈酸+miR-802抑制剂组、棕榈酸+转染对照组.采用RT-PCR及Western blotting检测胰岛素信号通路磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(又称Akt)及葡萄糖转运蛋白(GluT4)的mRNA及蛋白表达情况.结果 与正常对照组(1.458±0.264)相比,棕榈酸组miR-802 mRNA表达(3.108±0.513)明显升高.与棕榈酸组和棕榈酸+转染对照组相比,棕榈酸+miR-802模拟物组的miR-802 mRNA表达明显升高(3.108±0.513,3.442±0.104 vs.11.743±0.933),PI3K(0.724±0.032,0.682±0.059 vs.0.494±0.025)、Akt(0.819±0.044,0.718±0.033 vs.0.754±0.028)及GluT4(0.719±0.038,0.666±0.056 vs.0.427±0.031)mRNA表达明显下降,p-PI3K/PI3K(0.349±0.056,0.351±0.019 vs.0.195±0.026)、p-Akt/Akt(0.639±0.002,0.557±0.04 vs.0.261±0.075)及GluT4(0.648±0.028,0.590±0.026 vs.0.413±0.096)蛋白表达水平明显下降(P<0.01).与棕榈酸组及棕榈酸+转染对照组相比,棕榈酸+miR-802抑制剂组的miR-802 mRNA表达明显下降(3.108±0.513,3.442±0.104 vs.1.069±0.056),PI3K(0.724±0.032,0.682±0.059 vs.0.887±0.016)、Akt(0.819±0.044,0.718±0.033 vs.0.814±0.026)及GluT4(0.719±0.038,0.666±0.056 vs.0.908±0.054)mRNA表达升高,且p-PI3K/PI3K(0.349±0.056,0.351±0.019 vs.0.494±0.012)、p-Akt/Akt(0.639±0.002,0.557±0.04 vs.0.951±0.031)及GluT4(0.648±0.028,0.590±0.026 vs.0.756±0.007)蛋白表达水平也明显升高(P<0.01).结论 MiR-802调节了骨骼肌细胞胰岛素的敏感性及葡萄糖的转运,可能是2型糖尿病的潜在治疗靶点.

关键词：miR-802、肌纤维、骨骼、胰岛素抗药性、糖尿病、2型

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资助基金：国家自然科学基金81370900

在线出版日期：2020-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：798-803