siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响

摘要：

目的 探讨应用siRNA技术沉默EPAS1 (HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响.方法 原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定.构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果最好的靶点进行干扰;在常氧(37℃、5％CO2、20％O2)和低氧(37℃、5％CO2、2％O2)条件下分别培养24、48、72h,采用Western blotting检测PASMCs中EPAS1、VEGF蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况.结果 成功分离培养原代大鼠PASMCs并经免疫荧光鉴定证实.将特异性的EPAS1 siRNA脂质体转染到PASMCs,选择干扰效果最好的靶点2进行干扰.与常氧条件比较,低氧条件下PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高;沉默EPAS1后,无论低氧还是常氧条件下,PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显降低.结论 EPAS1基因参与了低氧条件下大鼠PASMCs增殖的调控,其调节可能是通过VEGF介导完成的.

关键词：EPAS1基因沉默、低氧、肺动脉平滑肌细胞、增殖

所属期刊栏目：42

分类号：R332(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金81160243;青海省留学回国人员科技活动项目青人社厅函[2011]518号This work was supported by the National Natural Science Foundation of China8160243;the Scientific and Technological Activities Project of Chinese Overseas Returnees2011-518

在线出版日期：2017-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：320-325