小鼠小肠干细胞谱系追踪方法的建立及其在放射损伤中的应用

摘要：

目的 利用Lgr5-EGFP-CreERT2/ROSA26-stop-EYFP小鼠建立谱系追踪方法,用于观察Lgr5+小肠干细胞在小肠组织更新中的作用,并研究辐射对小肠干细胞组织重建的影响.方法 通过基因型分析鉴定Lgr5-EGFP-CreERT2/ROSA26-stop-EYFP小鼠.他莫西芬诱导小鼠体内的荧光蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察诱导后小肠干细胞的分化.采用60Co γ射线(15Gy)照射Lgr5-EGFP-CreERT2/ROSA26-stop-EYFP小鼠,观察辐射对小肠干细胞组织重建的影响.结果 提取鼠尾DNA通过PCR方法鉴定Lgr5基因(174bp),获得双阳性小鼠.他莫西芬(100mg/kg)单次诱导后,激光共聚焦观察到Lgr5+小肠干细胞在诱导后5d开始分裂,7d已到达绒毛顶端,14d少量绒毛全部带有荧光,45d更多的小肠绒毛中存在荧光细胞,而且更加稠密.但在15Gy照射后小鼠小肠绒毛脱落严重,隐窝处没有荧光出现.结论 成功建立了小肠干细胞谱系追踪模型,并初步观察了辐射对小肠干细胞损伤的影响.

关键词：小肠干细胞、谱系追踪、辐射损伤

所属期刊栏目：40

分类号：R818.04(放射医学)

资助基金：国家重大新药创制专项课题2013ZX09J13102-02C;国家自然科学基金面上项目81272997This work was supported by the National Drug Discovery of Major Projects 2013ZX09J13102-02C and the National Natural Science Foundation of China 81272997

在线出版日期：2015-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：349-353