新城疫病毒Italien株辅助质粒的构建及功能鉴定

摘要：

目的 构建基于T7启动子的含新城疫病毒(NDV)Italien株核衣壳蛋白(NP)、磷酸化蛋白(P)和蛋白(L)基因的表达质粒,作为构建重组NDV所需的辅助质粒.方法 将NDV的NP、P和L基因酶切后置于T7启动子和核糖体进入位点序列的下游,分别构建NP、P和L基因的表达质粒,转染BSR-T7/5细胞,采用间接免疫荧光法(1FA)检测病毒蛋白的表达,利用微型基因组(MG-L)质粒检测辅助质粒组装核糖核酸蛋白质复合物(RNP)的功能.结果 测序证实辅助质粒构建正确.IFA检测可观察到NP和P基因的表达.与MG-L单转染对照组和空白对照组相比,辅助质粒和MG-L共转染后,报告基因萤火虫荧光素酶得到高效表达(P＜0.001).结论 成功构建了基于T7启动子的NDV辅助质粒,为进一步构建重组溶瘤NDV Italien株奠定了基础.

关键词：新城疫病毒、遗传学技术、溶瘤病毒、重组、辅助质粒

所属期刊栏目：37

分类号：R373-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金81172144

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：702-706