赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及直接竞争酶联免疫吸附法的建立

摘要：

目的 建立快速且灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)直接竞争酶联免疫吸附检测(cdELISA)方法.方法 采用OTA与卵清蛋白(OVA)偶联作为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合、克隆筛选,获得鼠抗OTA的杂交瘤细胞株;以ELISA方法测定抗体效价并鉴定抗体的IgG及亚类;用辣根过氧化物酶(HRP)标记OTA,建立cdELISA方法.结果 获得了3株稳定分泌高效价抗OTA单克隆抗体的杂交瘤细胞株(S-17-8、S-212-7和S-225-11),3株重链均为IgG1亚型,轻链为κ亚型;建立了cdELISA检测方法,检测下限为0.5ng/ml.结论 以抗OTA单克隆抗体和OTA-HRP为基础,建立了灵敏且省时的检测OTA的cdELISA方法,为进一步OTA快速筛查提供了条件.

关键词：赭曲霉毒素A、抗体、单克隆、酶联免疫吸附测定

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分类号：R392.116

资助基金：国家科技部"十一五"重大新药创制专项项目2009ZX09502-025;中医药行业科研专项基金200807042

在线出版日期：2011-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1440-1442