RNA干扰对HT29细胞PIDD蛋白表达及细胞耐药性影响的研究

摘要：

目的 观察氟尿嘧啶(5-FU)刺激后PIDD蛋白在结肠癌HT29细胞中分布的改变,以及小干扰RNA(siRNA)干扰PIDD蛋白前后,HT29细胞耐药性的变化.方法 用siRNA干扰HT29细胞内PIDD蛋白的表达,用5-FU刺激HT-29细胞.Western blotting法检测干扰前后细胞PIDD的表达,并比较5-FU刺激后干扰与未干扰HT-29细胞内PIDD在细胞中分布的变化.MTT比色法检测siRNA干扰前后细胞对5-FU的敏感性,并计算各组细胞的IC50值.结果 未受5-FU刺激前,PIDD蛋白主要分布于细胞质中;受5-FU刺激后,PIDD蛋白迁移至细胞核.siRNA干扰后细胞中PIDD表达总量有所下降,胞质及胞核中的表达均降低,受5-FU刺激后PIDD的表达也未见升高,迁移至胞核的PIDD也未增加.MTT检测证明5-FU对转染组(PIDD-360转染12h后的HT29细胞)的IC50值为0.23±0.06μg/ml,与正常组(未作处理的HT29细胞,IC50为2.71±0.70μg/ml)和对照组(阴性对照试剂转染12h后的HT29细胞,IC50为2.78±1.03μg/ml)比较显著降低(P＜0.05).结论 经siRNA干扰PIDD蛋白后,HT29细胞的耐药性明显下降,推测其机制与胞核中PIDD降低导致的NF-κB活性降低,细胞凋亡增多有关.

关键词：结肠肿瘤、PIDD蛋白、HT29细胞、RNA干扰、抗药性、肿瘤

所属期刊栏目：33

分类号：R735.35(肿瘤学)

资助基金：重庆市自然科学基金CSTC2006BB5060

在线出版日期：2009-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1444-1446