10.3321/j.issn:0577-7402.2006.04.021
Dextran分离纯化大鼠胰岛的生物学特性
目的探讨一种分离纯化大鼠胰岛的方法,并评价该法分离得到的胰岛的生物学特性.方法常规外科手术分离胰腺.然后将其剪为1mm3左右碎块,置于0.9mg/ml胶原酶V 37℃振荡消化10~17min,以含10%胎牛血清的Hank's液终止消化.60目筛网过滤.Dextran T40非连续密度梯度离心纯化胰岛.纯化后的胰岛经DTZ染色,吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色、放射免疫分析检测胰岛素分泌量,纯化后的胰岛进行异种移植,检测降糖效果.结果胰岛分布于11%Dextran和1640及11%和22%Dextran界面之间,平均每只Wistar大鼠消化后可获得2181±14个胰岛,纯化后回收1826±24个胰岛,胰岛收获量达(85.7±5.9)%,纯度高达95%以上.胰岛对葡萄糖刺激有良好的反应性,纯化后胰岛异种移植,可逆转实验性糖尿病SD大鼠血糖7~10天.结论胶原酶消化,Dextran T40 纯化是一种简单、高效的胰岛分离纯化方法,获得的胰岛有良好的生物学特性.
胰岛、分离、纯化、糖尿病、移植、大鼠
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Q578(激素)
2006-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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