应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白

摘要：

目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅱ(SPⅡ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HBV的表面抗原基因启动子Ⅱ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析.结果噬菌体经富集后,从随机筛选的20个克隆中得到4个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性分析,确定了和HBV SPⅡ结合的肝细胞蛋白--尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶4(NADHDH4).结论用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了HBV SPⅡ的结合蛋白,分析了该蛋白的编码基因,为进一步研究HBV的复制、转录、调节机制开辟了新的途径.

关键词：噬菌体展示技术、肝炎病毒、乙型、抗原、表面、启动区(遗传学)、筛选

所属期刊栏目：29

分类号：R512.6+3(传染病)

资助基金：国家自然科学基金C03011402,C30070689;军队杰出人才基金98H038;军队科技攻关青年基金0LQ138;军队科技攻关项目01MB135

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：23-26