正交设计优化CYP2C19基因多态性PCR体系

摘要：

目的 建立通用的CYP2C19*2和CYP2C19*3基因PCR反应体系,筛选出各反应因素的最佳水平,并确定最佳退火温度.方法 采用正交设计L16(45)在4个水平5个因素(Taq酶、引物、Mg2+、dNTP和模板DNA)对CYP2C19*2和CYP2C19*3基因PCR反应体系进行实验,两次结果分别用统计软件MINITAB进行分析,利用梯度PCR确定引物最佳退火温度.结果 CYP2C19*2和CYP2C19*3基因PCR反应的最佳反应条件为25μl体系中包含:Mg2+(25 mmol/L)1.0μ1、dNTPs(2.5 mmol/L)2.0μl、上游引物和下游引物(2.5 μmol/L)各1.5μl、模板DNA约30 ng、10×PCR缓冲液2.5μl、Taq酶2U、染料2.0μ1,退火温度为55℃.结论 建立了CYP2C19基因多态性检测方法的通用PCR反应条件.

关键词：正交设计、基因多态性、PCR体系、CYP2C19

所属期刊栏目：27

分类号：R968;R963(药理学)

在线出版日期：2012-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：480-483