干扰MH-S细胞株β-catenin表达的shRNA慢病毒载体构建及功能鉴定

摘要：

目的 针对β-catenin基因构建短发夹RNA (short harpin RNA,shRNA)慢病毒表达载体,鉴定β-catenin基因干扰效率,并检测其对小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S功能的影响.方法 设计并构建5个针对β-catenin基因的shRNA干扰载体.实验分为空白细胞对照组(MH-S)、二氧化硅诱导组(silica)、病毒干扰组(silica+LV-shβ-catenin)、病毒对照组(silica+LV-shβ-catenin-NC)4组,realtime-PCR检测各组细胞β-catenin基因mRNA的表达水平,ELISA检测各组细胞培养上清中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的分泌情况.结果 二氧化硅诱导后,与silica组和silica + LV-shβ-catenin组比较,silica+LV-shβ-catenin-NC组β-catenin mRNA的表达率降低(均有P＜0.05),silica+LV-shβ-catenin-NC组TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌减少(均有P＜0.05).结论 构建的shRNA慢病毒载体能够有效抑制经二氧化硅诱导的MH-S细胞株β-catenin基因表达,并抑制TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌,为体内矽肺纤维化的分子机制研究奠定基础.

关键词：RNA、慢病毒属、细胞因子类

所属期刊栏目：19

分类号：R181(流行病学与防疫)

资助基金：国家自然科学基金81102106;中国博士后科学基金2014M560189;天津市自然科学基金15JCQNJC10500

在线出版日期：2015-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：922-925