10.3969/j.issn.1008-4118.2023.01.001
应用核糖体展示技术筛选抗人p53单链抗体的效果
目的 运用核糖体展示技术筛选抗人p53单链抗体,并进行初步分析.方法 诱导表达p53蛋白,用其免疫小鼠.提取免疫小鼠脾脏组织的总RNA,通过反转录PCR和重叠延伸PCR分别扩增抗体重链可变区基因VH-Linker和轻链可变区基因VL-Linker,并合成VH-linker-VL型单链抗体基因.TNT T7 Quick for PCR DNA试剂盒对单链抗体基因进行体外转录与翻译,以p53蛋白为靶标,经过5轮筛选富集ScFv基因.将获取单链抗体片段进行原核表达后,采用ELISA法和细胞免疫学法检测.结果 成功构建抗p53单链抗体库,并筛选出p53蛋白具有较强结合活性的单链抗体株p53-scFv1、p53-scFv2和p53-scFv3,可用以检测细胞中的p53蛋白.结论 利用核糖体展示技术获得亲和力较好的抗人p53单链抗体,可为p53抗体的制备提供新思路.
p53蛋白、单链抗体、核糖体
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Q753(分子遗传学)
泉州医学高等专科学校科研项目XJK1617B
2023-04-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1-5,13