环介导等温扩增法(LAMP)检测最短尾短体线虫
为了快速、简便、准确地检测重要植物病原线虫—最短尾短体线虫(Pratylenchus brach yurus),依据GenBank中短体线虫的线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ(mtDNA COI)序列,设计了扩增最短尾短体线虫的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物,并对LAMP反应条件进行优化,成功建立了一种可特异、快速检测最短尾短体线虫的LAMP体系.该体系在64℃下反应60 min,扩增效率最高.用琼脂糖凝胶电泳、酶切分析和SYBR Green Ⅰ染色均能特异检测到最短尾短体线虫的扩增产物.所建立的LAMP体系能从供试的9种短体线虫和另外10种植物线虫中特异检测出最短尾短体线虫,其灵敏度可检测到1/200条线虫DNA,是常规PCR的10倍.表明本研究建立的最短尾短体线虫的LAMP检测体系,可用于最短尾短体线虫的快速检测.
最短尾短体线虫、环介导等温扩增、线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ、快速检测
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S432.4+5(病虫害及其防治)
国家自然科学基金项目31471750;广东省林业科技创新专项2015KJCX045
2019-03-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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