绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达

摘要：

通过计算机软件筛选出绵羊痘病毒基因组中心编码区的 ORF90核蛋白、ORF112融合蛋白、ORF117糖蛋白、ORF55膜蛋白和基因组末端的 ORF134宿主范围相关基因的6段 T、B 细胞优势抗原表位,以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头,串联合成1条全新的多表位嵌合基因 mE ,将其克隆到原核表达载体 pET-32中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建 pET32-mE 质粒；用 IPTG 在不同条件下诱导表达,确定最佳表达条件,表达产物经 SDS-PAGE 分析。结果表明,重组蛋白是分子质量为41 ku 的融合蛋白。在IPTG 浓度为0.5 mmol/L,温度为37℃、诱导4 h 时目的蛋白的表达量最大,约占菌体的32%。Western-blot-ting 试验表明,目的蛋白可被羊痘血清识别。

关键词：绵羊痘病毒、抗原表位、多表位、嵌合基因、原核表达

分类号：S852.65+4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31260609,31360533;西北民族大学中央高校基本科研业务费专项ZYZ2012072

在线出版日期：2015-02-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：86-90