增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP在大肠杆菌中的表达与纯化

摘要：

增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP(EGFP/V163A/S175G)是一种发光能力更强、更稳定的新型绿色荧光蛋白.为了获得大量高纯度的蛋白,将mut4EGFP基因插入原核表达载体pTWIN1中,使之与几丁质结合域(CBD)-内含肽(intein)融合,获得原核表达质粒pTWIN-M4.将pTWIN-M4转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示,CBD-intein-mut4EGFP融合蛋白在BL21(DE3)plysS中获得高效表达并以可溶性蛋白的形式存在.进一步采用几丁质柱纯化系统对表达产物进行纯化,得到了高纯度的mut4EGFP.

关键词：绿荧光蛋白、突变体mut4EGFP、表达、纯化

所属期刊栏目：23

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金39970559

在线出版日期：2005-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：489-491