半滑舌鳎颗粒酶B基因的克隆和表达分析

摘要：

颗粒酶(granzyme,Gzm)B是免疫炎症反应必不可少的介质,可激活半胱天冬酶3,进而诱导靶细胞的凋亡.本研究通过PCR扩增和RACE技术获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)颗粒酶B基因(CsGzmBl)的全长cDNA序列,并对其序列特征和表达水平进行了分析.结果显示,CsGzmBl cDNA全长为923bp,开放阅读框长度为780bp,编码259个氨基酸(前19个氨基酸残基为信号肽序列),5'非编码区为49bp,3'非编码区为94bp.CsGzmBl的基因组结构比较保守,由5个外显子和4个内含子组成.CsGzmBl蛋白包含2个N端糖基化位点、1个催化三联体"His63Asp 112Ser207"、1个"PHSRPYMA"结构域及6个保守的半胱氨酸.荧光定量PCR结果显示,CsGzmBl在半滑舌鳎健康成鱼不同组织中均有表达,其中,在脾脏中表达量最高,头肾、中肾、肝脏和鳃中表达量次之,在肌肉中表达量最低.与对照组0h相比,CsGzmBl在哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染后的不同时间点的脾脏、肠、肝脏、皮肤、鳃和肾脏中的表达水平均有不同程度的上调.研究表明,CsGzmBl基因在半滑舌鳎抵御哈维氏弧菌感染过程中发挥重要作用.

关键词：半滑舌鳎、哈维氏弧菌、颗粒酶B基因、表达分析

所属期刊栏目：43

分类号：Q522(核酸)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国水产科学研究院基本科研业务费共同资助

在线出版日期：2022-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：136-146