大竹蛏β-整合素基因SgβInt的特性分析和重组表达
整合素作为一种细胞粘附因子,在细胞粘附、迁移、增殖、凋亡和吞噬等过程中发挥重要作用.本研究利用分子克隆技术获得了大竹蛏(Solen grandis)β-整合素基因(SgβInt)的cDNA全长,分析了其编码氨基酸序列的进化特点,并以 SWISS-MODEL 预测了氨基酸序列的三级结构.SgβInt基因序列全长为1168 bp,5′和3′非编码区(UTR)分别为61 bp和18 bp,开放阅读框(ORF)为1089 bp,编码362个氨基酸,理论等电点约为4.98,分子量为30.0 kDa.通过荧光定量PCR法检测了SgβInt在健康大竹蛏各组织中以及大竹蛏受到脂多糖、肽聚糖和葡聚糖等微生物多糖刺激后的表达.结果显示,SgβInt在血细胞、鳃、肝胰腺、性腺、肌肉和外套膜等组织中均可表达,在鳃中的表达量最高;脂多糖、肽聚糖和葡聚糖都可以诱导SgβInt表达量上调,SgβInt的表达量分别在脂多糖和葡聚糖刺激后的3h和48h达到最高;肽聚糖刺激后SgβInt表达量上调幅度最大,在6h时达到最高,证实 SgβInt 参与大竹蛏抵御外源微生物的免疫应答.利用基因重组技术构建了 SgβInt 的重组表达载体,为进一步分析软体动物整合素的功能、揭示大竹蛏先天性免疫机制奠定了基础.
大竹蛏、整合素、免疫应答、荧光定量PCR
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S968.3(水产养殖技术)
广西海洋生物技术重点实验室开放基金资助课题资助This work was supported by Open Research Fund Program of Guangxi Key Laboratory of Marine BiotechnologyGLMBT-201504
2018-03-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
120-127