尼罗罗非鱼Xbp1-S基因克隆及表达分析

摘要：

为了了解尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)细胞转录因子Xbp1-S(OnXbp1-S)的基因序列特征及其在无乳链球菌(Streptococcus alactolyticus)应激和在B细胞分化中的作用,应用RACE克隆技术获得的OnXbp1-S基因全长1380 bp,包括开放阅读框ORF为1155 bp,5'端非编码区(5'UTR)长127 bp,3'端非编码区(3'UTR)长98 bp.OnXbp1-S序列分析推测该基因编码384个氨基酸,分子量为41.32 kDa,理论等电点为4.36.同源性分析显示,OnXbp1-S基因与其他鱼类的聚为一支,其中,与南极鳕(Notothenia coriiceps)相似性最高.荧光定量PCR及Western-blot结果显示,OnXbp1-S在各组织中均有表达,mRNA水平上在肝脏中表达量最高,蛋白水平上在胸腺中表达量最高,而在肌肉中表达量最低.无乳链球菌应激后,OnXbp1-S基因在肝脏和脾脏中的表达趋势相似,均在应激期间出现表达量上调,在192 h出现峰值.另外,免疫组化分析发现,OnXbp1-S因子在不同分化程度B细胞亚类中的表达呈现差异,在成熟B细胞中呈现高表达,而在未成熟B细胞中几乎不表达.研究结果表明,OnXbp1-S参与尼罗罗非鱼对无乳链球菌的免疫防御,和在B细胞分化中起作用.本研究将为进一步研究OnXbp1-S因子应答病原菌侵染的机理及促进B细胞分化机制提供理论依据.

关键词：尼罗罗非鱼、Xbp1-S、基因克隆、组织表达、无乳链球菌

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分类号：S917(水产基础科学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31472302,31172432;广东省自然科学基金项目2014A030313437共同资助[This work was supported by National Natural Science Foundation of China31472302 and 31172432;Natural Science Foundation of Guangdong2014A030313437]

在线出版日期：2018-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：73-82