基于gyrB基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原灿烂弧菌

摘要：

灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大.本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测灿烂弧菌的方法.构建合gyrB基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR,在Tm为62℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.338x+37.67,相关系数为0.999,扩增效率为0.99,最低能检测到20个拷贝.实验结果表明,该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对灿烂弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义.

关键词：gyrB基因、灿烂弧菌、实时定量PCR、SYBR Green Ⅰ

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分类号：S963.7(水产养殖技术)

资助基金：十二五863项目2012AA10A412-4;科研院所技术开发研究专项项目2011EG34219;国家科技支撑计划课题2012BAD17B03;国家自然科学基金项目30901120,31202016;青岛市战略性新兴产业培育计划项目13-4-1-65-hy

在线出版日期：2014-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：134-142