蛋白A介质抗体吸附性能及耐碱性的量热学

摘要：

对重组蛋白A(SpA)中参与抗体结合的Z结合域(SpAz),它的四串体重组配基SpA4z和耐碱性突变体SpA4M等用于抗体纯化的亲和配基进行研究,将上述分子偶联于Sepharose CL-6B基质制得3种亲和介质.抗体吸附平衡实验表明抗体与上述色谱介质均具有较高的结合常数,且四串体重组配基的亲和性高于单一Z结合域.用等温滴定微量热仪(ITC)研究了抗体分别在SpAZ-Seph-arose和SpA4z-Sepharose色谱介质上结合的量热学变化,并与游离的SpAz和SpA4z进行比较,解析了焓变(AH)与熵变(△S)对抗体结合的贡献.结果显示,配基固定化导致结合常数降低,配基与抗体结合过程是由△H驱动的.使用微量差示扫描量热仪(DSC)检测了SpA4z和SpA4m的碱性稳定性,结果表明SpA4m比SpA4z具有更强的稳定性,色谱实验进一步验证了这一结果.

关键词：抗体、色谱、生物分离、等温滴定量热、微量示差扫描量热

所属期刊栏目：34

分类号：O629.73(有机化学)

资助基金：国家自然科学基金21276189;天津市应用基础与前沿技术研究计划15JCYBJC48500

在线出版日期：2017-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：75-82