热不对称交错PCR克隆bapt基因侧翼序列

摘要：

紫杉醇是来源于红豆杉植物的抗癌药物,广泛应用于乳腺癌和小细胞肺癌等临床治疗.巴卡亭Ⅲ-氨基苯基丙酰-13-O-转移酶基因(bapt)的表达是紫杉醇合成的瓶颈,解析该基因侧翼序列是人工调控紫杉醇合成途径的前提.采用同源克隆和热不对称交错PCR技术,扩增获得bapt基因及其侧翼的染色体序列5.6 kb.生物信息学分析表明,bapt基因含有2个外显子和1个内含子,编码区长度1 338 bp;5'端侧冀序列1 604 bp,包含启动子元件;3'端2 582 bp,含有终止子元件242 bp.发现的转录元件将应用于代谢工程改造红豆杉细胞,提高紫杉醇产量.

关键词：红豆杉、紫杉醇、热不对称交错PCR、巴卡亭Ⅲ-氨基苯基丙酰-13-O-转移酶、3-氨基-3-苯基丙酰转移酶基因

所属期刊栏目：32

分类号：Q37(植物遗传学)

资助基金：国家基础研究计划课题2012CB721105.

在线出版日期：2015-02-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：59-63,78