10.3969/j.issn.1002-0179.2008.03.080
Gax基因过表达对低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及周期的作用
目的:探讨生长终止特异性同源盒(growth arrest-specific homeobox,Gax)基因转染在低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)中过表达及其对细胞增殖和周期的作用.方法:腺病毒介导Gax基因(adenovirus expressing Gax cDNA,Ad-Gax)转染体外培养的PASMCs.在常氧(21% O2)和低氧(2.5% O2)2、6、12、24和48 h条件下,利用RT-PCR和免疫细胞化学法分别测定转染前后PASMCs中Gax mRNA和蛋白表达;用四唑盐(MTT)比色法和流式细胞术检测各组PASMCs增殖和周期.结果:RT-PCR和免疫细胞化学法证实Ad-Gax转染后PASMCs中Gax能稳定过表达;MTT比色试验结果显示,未转染组常氧和低氧2、6、12、24和48 h时PASMCs吸光度值分别为0.38±0.02、0.44±0.11、0.48±0.05、0.59±0.07、0.67±0.03和0.75±0.18,低氧组比常氧组明显增加(P<0.05);而转染组各时相吸光度值分别为0.17±0.04、0.15±0.02、 0.24±0.11、0.33±0.13、0.31±0.03和0.37±0.09,低氧组比未转染组同时相点组明显降低(P<0.05、0.01).流式细胞仪检测结果表明,Ad-Gax转染对常氧条件下PASMCs的周期没有显著影响,但可使低氧处理后PASMCs的G0/G1比例较未转染组显著增高、S+G2/M比例显著降低(P<0.01);结论:Gax基因过表达能够抑制低氧性PASMCs的增殖.
Gax基因、低氧、肺动脉平滑肌细胞、增殖、细胞周期
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Q786(基因工程(遗传工程))
中国博士后科学基金20060400578
2009-02-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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