IL-12基因重组卡介苗免疫效应研究

摘要：

目的:本研究在已构建人IL-12基因重组卡介苗(rBCG-12),并在体外成功诱导表达IL-12的基础上,进一步研究其免疫后在小鼠体内诱导细胞和体液免疫应答的能力,探讨rBCG-12免疫后对小鼠免疫效应的影响.方法:近交系BALB/c小鼠36只,随机分3组:BCG组、rBCG-12组与PBS组.实验小鼠皮下多点注射细菌悬液0.3 mL/只,其中活菌量为1×106 CFU/mL,免疫一次,PBS组仅注入PBS液.末次免疫后6周、8周、10周、12周分别分离小鼠血清测定特异性抗体水平,同时分离脾细胞,体外培养经BCG-PPD刺激后检测脾细胞增殖(XTT比色法)活性和脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)分泌水平.结果:PBS对照组各时间点均未检测到特异性抗体的产生.免疫后8周时rBCG-12组检测到抗体产生,而BCG组在免疫后10周才检测到抗体产生,且10周时与rBCG-12组抗体水平差异无统计学意义,之后两组抗体水平均有明显增高,免疫后12周时抗体滴度分别达到了1/640(rBCG-12)组和1/320(BCG组)(P＜0.05).BCG组与rBCG-12组间脾细胞增殖反应变化趋势相同,但rBCG-12组增殖反应明显强于BCG组(P＜0.05).免疫后10周时两组细胞增殖均达到最高峰,之后逐渐下降,rBCG-12组较BCG组下降缓慢,12周时rBCG-12组的增殖反应仍然维持在高水平.免疫后6～8周BCG组和rBCG-12组IFN-γ的产生均呈逐渐上升趋势.BCG组IFN-γ量在免疫后8～10周达到最高峰,12周时IFN-γ量降至100 pg/mL.rBCG-12组8周时IFN-γ的量上升到约为200 pg/mL,之后仍继续增加,10周时达最高峰,约为350 pg/mL,12周时IFN-γ的量约为250 pg/mL,明显高于BCG组(P＜0.05).而各时间点各组IL-4产生水平均不明显,BCG组与rBCG-12间P＞0.05.结论:rBCG-12免疫后能明显改善机体免疫反应向Th1型极化,产生高水平的细胞免疫反应,而其对体液免疫反应有抑制的趋势,有利于机体抵抗结核菌感染.

关键词：白介素12、结核分枝杆菌、重组卡介苗、免疫反应

所属期刊栏目：23

分类号：R392.11

资助基金：国家自然基金资助项目30271172;教育部重点资助项目104152

在线出版日期：2009-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：560-562