EBV-LMP1 cDNA克隆与真核表达载体的构建及体外表达

摘要：

目的:从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)cDNA,构建真核表达质粒pIRES-LMP1,并检测其在体外的表达.方法:利用分子生物学技术,提取鼻咽癌总RNA,逆转录PCR获得LMP1cDNA,克隆入pDrive Cloning Vector并测序,利用引物上设计的酶切位点NheI和EcoRI将LMP1插入真核表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Western blot检测LMP1的表达.结果:扩增的LMP1cDNA为1301bp,核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1分子.结论:实验所构建的pIRES-LMP1表达质粒能在体外表达LMP1分子.

关键词：潜伏膜蛋白1(LMP1)、cDNA克隆、核酸测序、真核表达载体、质粒pIRES

所属期刊栏目：20

分类号：R687(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金30270524

在线出版日期：2005-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：426-429