过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响
目的:研究CD44v6基因过表达对SW480细胞侵袭和迁移能力的影响.方法:慢病毒介导的CD44v6过表达细胞(CD44v6组)和空载体对照细胞(NC组)由前期实验构建,采用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达、实时荧光定量PCR检测CD44v6 mRNA表达水平、免疫荧光检测Flag标签蛋白三种方法重新鉴定过表达细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕试验和Transwell试验检测细胞侵袭和迁移能力.结果:绿色荧光蛋白观察显示细胞转染效率近100%;实时荧光定量PCR显示CD44v6组细胞CD44v6 mRNA表达水平较对照组显著升高(P<0.001);Flag标签蛋白免疫荧光染色显示过表达C D44v6蛋白主要定位于细胞膜.CCK-8结果显示2组细胞增殖无明显差异;划痕试验结果显示CD44v6组细胞划痕愈合指数较对照组显著增高(P<0.05);Transwell试验结果显示CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较对照组显著增高(均P<0.05),且CD44v6抗体处理后,CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较前显著减低(均P<0.05).结论:CD44v基因过表达能显著增强SW480细胞侵袭和迁移能力.
大肠癌、侵袭、转移、CD44v6、过表达
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温州市科技局基金资助项目,No.Y20140713 温州医科大学附属第一医院科研孵化基金资助项目,NoFHY2014013;the Science Foundation of Health Bureau of Wenzhou City of Zhejiang,No.Y20140713;the Incubation Program of the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,No.FHY2014013
2016-05-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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