miR-126调控胃癌细胞VEGFA及其下游靶蛋白Akt、mTOR、Erk1/2的表达
目的:本研究拟明确miR-126对胃癌细胞血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGFA)及其下游磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3 kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases/extracellular regulated protein kinases,MAPK/Erk)两条信号通路上核心蛋白Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin protein,mTOR)和细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,Erkl/2)表达的调控作用,从而来初步探讨miR-126影响胃癌细胞恶性表型的可能机制.方法:选取人胃腺癌细胞SGC-7901作为实验细胞,分空白组(mock)、miR-126慢病毒实验组(Lenti-miR-126)、慢病毒对照组(Lenticontrol)、miR-126寡核苷酸抑制组(locked nucleic acid anti miR-126 0ligonucleotides group,LNA-miR-126)与寡核苷酸对照组(LNA-control)共5组.利用miR-126慢病毒和miR-126 LNA power inhibitor探针转染SGC-7901细胞系,转染后72 h观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达情况,感染效率＞70％,提取细胞总小RNA和总蛋白,利用实时定量PCR检测miR-126的表达情况,同时通过Westem blot检测VEGFA及下游信号通路上核心蛋白Erk、Akt、mTOR的表达.结果:Western blot显示miR-126慢病毒实验组的VEGFA及其下游靶蛋白Akt、mTOR、Erk1/2表达较空白组明显降低(1.00±0.00 vs 1.60±0.19,1.00±0.00 vs 1.89±0.23,1.00±0.00 vs 2.11±0.38,1.00±0.00 vs 1.52±0.36,均P＜0.01),miR-126寡核苷酸抑制组的VEGFA及其下游靶蛋白Akt、mTOR、Erk1/2表达较空白组明显升高(2.46±0.31 vs 1.60±0.19,3.09±0.44 vs 1.89±0.23,3.83±0.64 vs 2.11±0.38,2.26±0.30 vs 1.52±0.36,均P＜0.01).结论:miR-126可调控胃癌细胞VEGFA及其下游靶蛋白的表达,胃癌中可能存在miR-126/VEGFA信号通路调控胃癌的血管新生.
miR-126、血管内皮生长因子A、胃癌血管新生
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国家自然科学基金资助项目,No.81160307;National Natural Science Foundation of China,No.81160307
2014-02-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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