pAcGFP1-N1-FOXQ1真核表达载体的构建及在大肠癌细胞系Colo-320中的表达

摘要：

目的:构建人FOXQ1(homo sapiens forkhead box Q1)基因真核表达载体pAcGFPl-N1-FOXQ1,并在大肠癌细胞系Colo-320中瞬时表达.方法:利用PCR方法从YR Gene装载了FOXQ1基因全长cDNA序列(NM_033260)的质粒中扩增出FOXQ1的cDNA片段,与真核表达载体pAcGFPl-N1连接,重组质粒经PCR、双酶切和测序鉴定无误后,采用Lipofectamine 2000瞬时转染Colo-320细胞,应用荧光显微镜观察转染效率、Western blot检测FOXQ1蛋白表达水平.结果:成功构建了真核表达载体pAcGFPl-N1FOXQ1,PCR、双酶切和测序鉴定结果均正确,载体能在Colo-320细胞中正确表达FOXQ1蛋白.结论:成功构建FOXQ1真核表达载体,为进一步开展体内、体外实验,研究OXQ1基因在肿瘤发生发展中的功能奠定了实验基础.

关键词：FOXQ1基因、pAcGFP1-N1质粒、构建

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资助基金：国家自然科学基金资助项目,No.81260323;云南省科技厅-昆明医科大学联合基金资助项目,No.2012FB095;云南省教育厅科学研究基金项目,No.2012J004;云南省卫生厅基金资助项目.No.2010NS014;National Natural Science Foundation of China,No.81260323;the Joint Foundation of Science and Technology Department of Yunnan Province and Kunming Medical University,No.2012FB095;the Scientific Research Projects of Yunnan Provincial Education Department,No.2012J004;the Foundation of Yunnan Provincial Health Department,No.2010NS014

在线出版日期：2013-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1966-1971