亚砷酸钠对大鼠骨髓间充质干细胞的过氧化损伤

摘要：

目的:探索亚砷酸钠(sodiumarsenite,NaAsO2)对原代培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的氧化应激作用.方法:采集4周龄SD大鼠骨髓,体外培养获得大鼠骨髓MSCs,取第3代大鼠骨髓MSCs,将不同浓度NaAsO2(10、20、30、40和50 μmol/L)作用于大鼠骨髓MSCs,进行染毒,染毒时间为24 h,采用细胞毒性试验法观察NaAsO2对大鼠MSCs的细胞毒性作用,利用2’,7’-二乙酰二氯荧光素(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,并测定细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,同时测定细胞内还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的含量,Caspase 3试剂盒检测Caspase 3酶活性.结果:不同浓度的NaAsO.作用于大鼠骨髓MSCs,用MTS法进行细胞毒性检测显示,当NaAsO2浓度≥20 μmol/L时,大鼠骨髓MSCs吸光度值分别为1.98±0.09、1.45±0.12、1.26±0.11和1.02±0.15,与对照组比较明显降低(P＜0.01)；不同浓度NaAsO2作用于大鼠骨髓MSCs,DCF荧光强度分别为1572±124,1998±97、2337±210、2878±154和3960±135,与对照组相比均明显增高(P＜0.05)；不同浓度NaAsO2作用于大鼠骨髓MSCs,MDA分别为1.4 EU/mL±0.06 EU/mL、1.9 EU/mL±0.12 EU/mL、2.3 EU/mL±0.08 EU/mL、2.6EU/mL±0.11 EU/mL和3.3 EU/mL±0.09 EU/mL,与对照组相比均明显增高(P＜0.05)；不同浓度NaAsO.作用于大鼠骨髓MSCs,SOD分别为29 EU/mL±0.19 EU/mL、22 EU/mL±0.12EU/mL、17 EU/mL±0.06 EU/mL、12 EU/mL±0.11 EU/mL和10 EU/mL±0.06 EU/mL,与对照组相比均明显降低(P＜0.05)；当NaAsO2浓度≥20 μmol/L时,大鼠骨髓MSCs的GSH分别为75 EU/mL±0.11 EU/mL、71 EU/mL±0.8 EU/mL、62 EU/mL±0.12 EU/mL和54EU/mL±0.9 EU/mL,与对照组相比均明显降低(P＜0.05).结论:NaAsO2可以诱导大鼠骨髓MSCs氧化损伤增加,提示氧化应激可能是NaAsO2致大鼠骨髓MSCs细胞毒作用机制之一.

关键词：亚砷酸钠、间充质干细胞、氧化损伤

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资助基金：国家自然科学基金资助项目,No.30960338;兵团博士基金资助项目,No.2011BB019;兵团重点领域科技攻关基金资助项目,No.2011BA058;the National Natural Science Foundation of China,No.30960338;the Doctoral Foundation of Xinjiang Production and Construction Corps,No.2011BB019;the Key Scientific and Technological Project of Xinjiang Production and Construction Corps,No.2011BA058

在线出版日期：2013-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1649-1653