肿瘤坏死因子-α刺激骨髓间充质干细胞后对肝星状细胞凋亡的促进作用

摘要：

目的:观察肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)情况下,共培养体系中BMSCs对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)凋亡的影响并探讨其机制.方法:全骨髓贴壁法分离、纯化SD大鼠BMSCs,传至第3-4代使用.运用6孔Transwell板建立共培养体系,将TNF-α刺激BMSCs后与HSCs共培养.实验分HSCs空白对照组、BMSCs空白对照组、正常共培养组、刺激共培养组；采用流式细胞术检测HSCs凋亡,RT-PCR、Western blot分别检测RhoA与HGFmRNA及蛋白表达,ELISA测定细胞培养上清液中HGF含量.结果:刺激共培养组24 h、48 h HSCs RhoA蛋白(24 h:0.864±0.006,48 h:0.688±0.013)及mRNA(24 h:0.809±0.004,48 h:0.494±0.010)表达进行性下降,与正常共培养组和HSCs空白对照组比较有显著性差异(P＜0.01),BMSCs HGF蛋白(24 h:1.032±0.003,48 h:1.060±0.003)及mRNA(24 h:0.857±0.004,48 h:1.195±0.010)表达呈时间依赖性递增,与正常共培养组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；刺激共培养组24 h、48 h HSCs凋亡率分别为6.583％±0.091％、29.960％±0.223％,与正常共培养组(24 h:4.700％±0.168％,48 h:23.140％±0.115％)比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:TNF-α刺激BMSCs后与HSCs共培养明显促进HSCs凋亡,其机制可能是BMSCs通过旁分泌HGF抑制HSCs RhoA表达实现的.

关键词：骨髓间充质干细胞、肝星状细胞、肿瘤坏死因子-α、肝细胞生长因子、RhoA

所属期刊栏目：20

分类号：R318.14(医用一般科学)

资助基金：广西自然科学基金0897008

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1713-1719