转染重组质粒pBudCE4.1-CYP3A4-GST A1的肝细胞系的建立及功能评价
目的:获得一株适合用于生物人工肝支持系统的细胞材料.方法:用已构建好的重组质粒pBudCE4.1-CYP3A4-GST A1转染肝脏肿瘤细胞系C3A,用Zeocin筛选,所得细胞系命名为C3A-未优势化;通过qRT-PCR方法检测目的基因表达情况;对转染重组质粒的肝脏肿瘤细胞系C3A的合成、代谢、解毒等功能及性状进行综合评价,结果:成功构建了转染重组质粒pBudCE4.1-CYP 3A4-GST A1的细胞系;构建好的C3A-未优势化细胞系通过qRT-PCR方法检测其目的基因CYP 3A4和GST A1的表达量较正常C3A细胞系高;通过色谱法证明CYP 3A4活性较正常C3A细胞系高;用免疫组织化学实验证实目的基因GST A1的表达较正常C3A细胞系多;另外,对利多卡因的代谢能力亦高于正常C3A细胞.结论:构建的C3A-未优势化细胞系功能有所改善,有望成为生物人工肝系统的细胞材料.
细胞色素P450 3A4、谷胱甘肽硫转移酶A1、药物代谢、生物人工肝支持系统
20
R331.14(人体生理学)
中国人民解放军军队临床高新技术重大基金资助项目2010gxj097
2012-10-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1081-1087