TGF-β1对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响
目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响.方法:MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响:将BRL-3A细胞分为6组,分别给予不同浓度的TGF-β1(0、2、4、6、8、10μg/L),检测各组细胞24、36、48 h时的增殖活性;进一步将BRL-3A细胞分为TGF-β1处理组和对照组,分别给予和不予TGF-β1(8μg/L),进行如下检测:流式细胞仪检测两组细胞24、36、48 h时的凋亡情况和细胞周期分布;实时定量RT-PCR检测两组细胞24、36、48 h时Cyclin E、Cdk-2、EGF、HGF、Bcl-2、c-Myc、MMP9、NF-κB基因的表达变化.结果:MTT结果显示,各浓度TGF-β1组在24、36、48 h时的细胞增殖活性差异无统计学意义;流式细胞仪分析结果显示,TGF-β1处理组24、36、48 h时的细胞凋亡率和细胞周期分布与对照组间的差异均无统计学意义;实时定量RT-PCR发现,TGF-β1处理组相对于对照组,Cyclin E mRNA、Cdk2 mRNA、EGF mRNA在24 h时分别下调至0.194±0.103、0.181±0.064、0.634±0.116倍,36 h时分别下调至0.379±0.173、0.457±0.123、0.619±0.112倍,48 h时分别上调至1.956±0.215、2.17±0.471、7.66±0.437倍;HGF mRNA在24、36、48 h时均明显下调,分别至0.152±0.068、0.146±0.053、0.158±0.061倍;Bcl-2mRNA在24、36 h时无统计学差异,48 h时上调至1.567±0.115倍;c-Myc mRNA、MMP9mRNA、NF-κBmRNA在3个时刻均上调,24h时分别至1.742±0.389、3.484±0.411、1.625±0.369倍,36 h时分别至2.292±0.361、1.563±0.323、1.486±0.494倍,48 h时分别至2.499±0.475、2.233±0.493、3.612±0.364倍.以上基因表达差异均有统计学意义(P<0.05).结论:大鼠肝细胞系BRL-3A对TGF-β1促凋亡和细胞周期阻滞作用的敏感性低下,可能与非Smads途径的激活,NF-κB、Bcl-2、c-Myc、MMP9表达的上调有关.
转化生长因子β1、BRL-3A细胞、细胞凋亡、细胞周期、肝再生
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R329(人体形态学)
艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项;国家自然科学基金;北京市自然科学基金;北京市科技新星计划;首都医科大学基础临床科研合作项目;北京市教委科技发展计划
2011-12-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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