幽门螺杆菌5种候选疫苗抗原基因的克隆、表达及抗原性的鉴定

摘要：

目的:构建含人H pylori 5种候选疫苗抗原Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB的编码基因的重组质粒并研究其抗原性.方法:应用PCR技术从H pylori染色体中扩增编码Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB的基因片段,将其T-A克隆和测序,并与GenBank公布的其他H pylori菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至融合表达载体pGEX-4T-1上中进行表达,用GST亲和层析对其进行纯化,纯化产物用于对29株小鼠抗H pylori-全菌单克隆抗体(mAb)的鉴定及与H pylori感染患者血清进行Western blot分析.结果:扩增的Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB基因全长分别为528 bp,351 bp,675 bp,855 bp,1704 bp(GenBank登录号分别为DQ106902,DQ141574,DQ141577,DQ141575,DQ141576),与GenBank公布的其他菌株的核酸序列的同源性在95%-99%,表达Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB融合蛋白的相对分子质量分别约为48 000,41 000,52 000,60 000,91 000 Da,29株小鼠抗H pylori全菌mAb中针对Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB抗原的分别为4,5,5,1,6株,5种抗原的纯化产物均可被H pylori感染患者血清特异性识别.结论:重组表达的Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB均具有较好的抗原性.

关键词：幽门螺杆菌、候选疫苗抗原、克隆、基因表达、抗原性

所属期刊栏目：14

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2605-2609