环氧合酶-2对人肝癌细胞增殖和凋亡的调节作用

摘要：

目的:观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在肝癌细胞中表达,探讨COX-2抑制剂celecoxib对肝癌细胞增殖和凋亡的作用.方法:免疫细胞化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法研究COX-2在肝癌细胞株中表达;MTT法观察COX-2抑制剂对肝癌细胞增殖的影响;透射电镜及流式细胞仪观察celecoxib诱导肝癌细胞凋亡的作用、对细胞周期的影响及MDR1/P-gp表达的变化;用RT-PCR方法检测Survivin mRNA药物处理后表达的变化.结果:celecoxib对肝癌细胞抑制增殖、诱导凋亡呈时间和剂量依赖性.celecoxib作用HepG248 h抑制率为70.98%±0.67%(200 μmol/L)、47.93%±1.08%(100μmol/L);Bel-7402为57.29%±0.67%(200μmol/L)、43.84%±0.86%(100 μmol/L);同样浓度但作用20 h,HepG2为45.51%±1.35%(200μmol/L),14.35%±1.55%(100μmol/L);Bel-7402则为34.35%±0.63%(200μmol/L),15.35%±0.88%(100 μmol/L),不同浓度以及不同作用时间相比均有显著差异(P＜0.01);100 μmol/Lcelecoxib作用24,48,72,96 h的肝癌细胞凋亡率分别为12.2%±2.44%,4.0%±1.67%,20.4%±4.38%,57.9%±5.74%(HepG2)和3.0%±1.05%,18.5%±3.51%,29.3%±3.25%,48.4%±4.77%(Bel-7402),与对照组相比有显著差异(P＜0.01);细胞周期分布改变,G0/G1期细胞比例增加,24,48,72 h分别为:44.17%±1.01%,59.60%±0.61%,62.7%±1.22%(HepG2)和47.80%±0.41%,58.60%±0.46%,78.40%±1.95%(Bel-7402),与对照组比较有显著差异(P＜0.01);对照组PCNA蛋白表达呈强阳性(++4),经药物处理后表达减弱,并随时间延长而显著;HepG2中COX-2蛋白表达明显弱于Bel-7402,药物处理后表达也不同.Survivin在肝癌细胞株中呈高表达状态,celecoxib作用48 h mRNA表达降至零,而72 h后表达水平又有上升;两株肝癌细胞中经celecoxib处理后,MDR1/P-gp表达有降低的趋势(Bel-7402),或是基本上不受影响(HepG2).结论:COX-2抑制剂celecoxib体外对肝癌细胞有较强的细胞毒作用且以剂量、时间依赖方式抑制细胞增殖,并诱导凋亡,使细胞周期阻滞于G1/S期.COX-2与P-gp,Survivin表达密切相关.

关键词：环氧合酶-2、肝癌、塞来昔布、Survivin、多药耐药

所属期刊栏目：14

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1382-1387