ntPCR-RFLP检测HBV阿德福韦耐药变异-rtA181V变异

摘要：

目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtA181V变异的快速检测方法.方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt181 A)PCR产物中含有BlpⅠ酶切位点(5'GCTNAGC3'),而变异株(rt181V)无此限制性酶切位点.选取4份应用ADV治疗1 a以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、BlpⅠ酶切、30 g/L琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析.并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各一例进行HBV RT区基因序列分析及对照质粒的构建结果:自4份血清标本中检测到2例rtA181V变异.所建立的ntPCR-RFLP方法灵敏度高,可以检测到103copies/L的HBV DNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致.结论:应用ntPCR-RFLP方法检测rtA181V变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于ADV耐药变异的临床监测工作.

关键词：阿德福韦、肝炎病毒、乙型、变异

所属期刊栏目：14

分类号：R4(临床医学)

资助基金：首都医学发展科研项目2002-3046

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：714-717